表达PRRSV GP3蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株的构建

摘要

构建表达猪PRRSV GP3蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。将去信号肽序列的PRRSV ORF3基因插入到表达载体pYA3341(Asd+)中，构建重组质粒pYA3341-ORF3。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(Asd-、Cya-、Crp-)，获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-ORF3).体外鉴定重组菌表达的GP3蛋白、重组菌特性及小鼠免疫试验。酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功;SDS-PAGE电泳及Western blot检测有GP3特异性蛋白条带;小鼠免疫后可检测到GP3蛋白抗体。成功构建了能稳定表达PRRSV GP3蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株.