间接酶联免疫吸附检测鸭肝炎抗体试验方法的建立及其在检测血清和卵黄抗体中的应用

摘要

本试验以氯仿去脂、超速离心结合蔗糖密度梯度离心纯化的I型鸭肝炎病毒(DHV-I)作为包被抗原，建立了检测鸭肝炎抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。该ELISA的特异性、敏感性及重复性较好，能用于检测鸭肝炎抗体。用DHV-I弱毒活疫苗经皮下免疫第一组产蛋种鸭，第二组种鸭注射生理盐水作为阴性对照组。在免疫后第3、5、7、14、21、28、35、42、49、56天采血分离血清和收集种蛋提取卵黄抗体，用建立的间接ELISA法检测血清和卵黄抗体中的鸭肝炎抗体效价。第三组种鸭间隔14天共免疫2次，在首免后每个月都收集血清检测抗体效价，持续检测6个月。试验结果表明：第一组种鸭免疫后3天时就可用ELISA检测到血清和卵黄中的鸭肝炎抗体，抗体效价分别在21、28天达到最高峰，随后稍有下降，但56天时两者仍呈阳性;阴性对照全为阴性;第三组种鸭的血清抗体比第一组的明显高得多且在6个月内都保持在较高水平。