Z-VAD-fmk对玉米赤酶烯酮致猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响

摘要

目的：旨在研究ZEA对体外培养的猪卵巢颗粒细胞的凋亡作用，并探讨Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对其凋亡作用的影响。 方法：采用机械分离法从1~5mm的卵泡中提取猪卵巢颗粒细胞，MTT法测定细胞生长曲线；于细胞对数生长期加入不同浓度的ZEA或Z-VAD—FMK+ZEA。作用24h后用MTT法测定细胞活性；TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡。 结果：结果表明分离培养的颗粒细胞生长状态良好，MTT测得24h~96 h为细胞对微生长期，ZEA抑制50%细胞增殖浓度(IC50)约为90μM.MTT法和TUNEL测得60μM、90μM和120μM的ZEA均能抑制细胞增殖并导致细胞凋亡，并呈剂量效应关系，各组与对照组相比差异极显著(P<0.01).而Z-VAD-FMK+90μM ZEA的细胞活性显著高于90μM ZEA组(P<0.05)，凋亡率极显著低于90μM ZEA组(P<0.01)。 结论：结果提示μM级别ZEA抑制猪卵巢颗粒细胞增殖，并诱导其凋亡，呈剂量依赖性，Z-VAD—FMK能显著抑制其作用，推测ZEA诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡依赖Caspase凋亡通路。