欧洲鳗鲡抗体生成规律的研究

摘要

从蛋白质和基因水平研究了欧洲鳗鲡(欧鳗)的抗体生成规律，采用山羊IgG-琼脂糖免疫亲和层析法分离纯化经山羊IgG背部肌肉注射后的欧洲鳗血清免疫球蛋白(Ig)，通过SDS-PAGE电泳鉴定其成分：免疫球蛋白免疫家兔后制备其特异性兔抗血清，并运用间接ELISA法检测不同时相欧鳗血清抗体水甲的变化;同时，利用荧光定量PCR研究了不同时相Ig基因在肾脏、脾脏和鳃中表达量的变化。结果表明：纯化后的Ig经SDS-PAGE榆测含有一条分子质量约68 ku重链，以及分子量分别为26 ku和28 ku的两条轻链，由其制备的兔抗Ig血清ELISA效价达1，51 200：ELISA检测结果表明欧鳗血清抗体水平在28 d达到峰值，而荧光定量PCR结果显示在脾脏Ig基因表达水平14 d达到峰值，肾脏和鳃均在21 d达到峰值，血清抗体水平和三种组织器官中的Ig基因表达水平的变化规律均为先升高、达到峰值后再降低。结论：本文阐述了欧鳗抗体生成规律，为深入了解鱼类的免疫机制奠定了基础。