减毒素沙门氏菌介导的禽呼肠孤病毒σC基因疫苗的构建及其免疫特性初步研究

摘要

根据GenBank中发表的禽呼肠孤病毒(ARV)S1133毒株的σC基因序列，设计引物扩增σC基因，构建pVAX1-σC重组真核表达质粒，经对其进行脂质体转染COs-7细胞，以间接免疫荧光试验检验证实pVAX1-σC重组真核表达质粒在COS-7细胞中可进行表达。试验将pVAx-σC真核表达质粒电转入减毒沙门氏菌，成功构建了介导禽呼肠孤病毒σC基因疫苗的重组减毒沙门氏菌株SL7207(pVAX1-σC)。将重组减毒沙门氏菌疫苗株SL7207(pVAX1-σC)以1.0×109CFU分别于6日龄和20日龄2次免疫雏鸡，结果表明在雏鸡免疫2周后，其可诱导机体产生ARVσC蛋白的特异血清IgG抗体，抗体平均效价为0.207，免疫组与空载体对照组SL7207(pVAX1)和空白对照组比较，抗体效价差异显著(P<0.01)，SL7207(pVAX1-σC)对雏鸡具有良好的免疫原性和安全性。试验组于二次免疫后3周进行ARV S1133株攻毒实验，结果表明实验疫苗组对雏鸡的保护率为66.7％。