山羊痘病毒klp2基因的克隆与序列分析

摘要

用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-sTV44-55，提取其基因组为模板，设计klp2基因的特异性引物并进行PCR扩增，获得了1643bp的DNA片段，并将PcR产物克隆至pGEM-T EaSy载体。酶切鉴定、PCR鉴定和测序结果表明,成功获得了klp2基因，获得的klp2基因内存在ClaⅠ、AflⅡ、ScaⅠ等三个唯一酶切位点。核苷酸和氨基酸同源性分析表明,弱毒疫苗株G14-STV44-55TK基因与基因BANK中发表的8个参考毒株的同源性在87％和85％以上，说明羊痘病毒TK基因具有较高的保守性。