重组外源基因的猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒的构建与鉴定

摘要

将猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白第165～200位氧基酸多肽嵌合在猪细小病毒(PPV)、VP2 N端,然后重组到腺病毒pAdEasy-1表达系统中,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒(rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap).IFA和Western-blotting分析分别可见特异性荧光和大小约为64 kD的特异性带.表明rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap在HEK-293细胞中成功地表达了PPV:VP2和PCV2:Cap蛋白.红细胞凝集试验证实,表达的嵌合PPV:VP2-PCV2:Cap蛋白具有与全病毒类似的血凝活性.电镜现察嵌合PPV:VP2-PCV:Cap蛋白的粗提物.发现可自行装配成许多病毒样粒子[PPV:VLP(PCV2)].