绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白成分分析及其免疫试验

摘要

采用TritonX-100裂解和0.6％ KI提取的方法制备绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白,经12％SDS-PAGE分析,表明其分子量范围在14.4～125.9KD之间;分别制备抗Y-98株全细胞抗原和外膜蛋白高免血清,经Western-blotting分析,表明外膜蛋白为绵羊肺炎支原体的主要保护性抗原,而在外膜蛋白,67.6KD、39.3KD和28.8KD多肽为其主要保护性抗原.利用ELISA方法和MTT法对外膜蛋白引起的体液免疫和细胞免疫功能进行了测定,结果表明膜蛋白能够诱导机体产生高效价的抗体,免疫后第7、14和28d效价分别达到了1∶24.25、1∶27.75和1∶28.75;膜蛋白具有非特异性和特异性致有丝分裂作用,在免疫前0d及免疫后28d对T淋巴细胞刺激的转化率分别为8.46％和18.3％.