牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立

摘要

通过对GenBank中12条BVDV全序列和29条CSFV全序列综合比对分析,设计一对BVDV的特异扩增引物,扩增片段长900bp,通过对退火温度、镁离子浓度、引物浓度、循环数进行优化,确定反应条件最佳反应条件.通过对BVDVOregonC24V株、NADL株、牦牛株、BVDVPK株、OregonC24V株/CSFV石门株混合样品、CSFV石门株、HCLV株和CSFVJL野毒株、PK15细胞、牛睾丸细胞、新生牛血清进行PCR扩增,证明本研究建立的PCR方法对BVDV特异性强,扩增效率高,能够对猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒进行鉴别诊断,为猪源BVDV的分子流行病学调查提供了良好的技术手段.