丝状支原体丝状亚种SC型中国不同地区分离株脂蛋白Q基因的分子特征

摘要

本实验根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株X、Ben I、Qing I、Mu I和模式株PG1中获得了LppQ基因1303bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒.采用Sanger's双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定,获得了X、Ben I、Qing I、Mu I和模式株PG1株LppQ基因核苷酸序.核苷酸序列比较结果显示,国内4个MmmSC分离株与GeneBank公布的LppQ基因核苷酸序列同源性均在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99﹪以上;与模式株PG1的核苷酸序列同源性在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99.3﹪以上.国内4个MmmSC分离株之间的核苷酸序列同源性均在99.7﹪以上,氨基酸序列同源性均在99.3﹪以上.通过对MmmSC LppQ-CH1蛋白氨基酸亲水性分析证实其N末端较C末端富含亲水氨基酸;蛋白表面可能性预测证实N末端较C末端更有可能定位在蛋白表面.