刺参酸性粘多糖对DEN诱发肝癌大鼠细胞周期的影响

摘要

目的:观察刺参酸性粘多糖(SJAMP)对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌形成的抑制作用并研究其对细胞周期的影响.方法:将50只雄性wistar大鼠随机分为5组.正常对照组,肝癌模型组,SJAMP干预高、中、低剂量组(70、35、17.5mg/kg体重),每组10只.SJAMP各干预组在建立肝癌模型的同时,灌胃SJAMP,16周后停药,处死大鼠.肉眼观察大鼠肝脏结节发生情况;电镜下观察大鼠肝细胞形态;通过RT-PCR法检测细胞周期素D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)mRNA的表达;通过western-blot印迹法检测pRb、E2F-1的表达.结果:SJAMP各干预组结节数均低于模型组,高剂量组肝表面结节数最少.电镜下发现,SJAMP干预组的大鼠肝细胞中出现数量不等的凋亡小体.RT-PCR结果显示,与肝癌模型组相比,各组大鼠cyclinD1表达降低(F=49.91,q=5.94～18.52,P＜0.05);CDK4表达降低,差别有显著性(F=50.21,q=5.72～18.08,P＜0.05).Western-blot结果显示,与肝癌模型组相比,各组大鼠pRb蛋白表达增加,差别有显著性(F=63.25,q=3.56～16.36,P＜0.05);E2F-1蛋白表达降低,差别有显著性(F=268.10,q=14.55～35.45,P＜0.05).结论:SJAMP对DEN诱发大鼠肝癌形成有抑制作用,其机制可能通过抑制cyclinD1、CDK4mRNA、E2F-1的表达,诱导细胞周期阻滞,从而抑制肝癌细胞过度增殖.