河豚毒素的薄层色谱法定量分析

摘要

1目的建立用于TTX的分离、鉴定、定量及相关研究的TLC方法。2方法将TTX样品溶液喷加到硅胶-CMC薄层板上，用S1：异丙醇-醋酸-水，14：1：5（V/V）、s2：正丁醇-醋酸-水，2：1：1（V/V）或S3：正丁醇-醋酸-水-甲苯，14：7：7：3．5（V/V）在双底展开缸上行展开180mm。将展开后挥去溶剂的薄层板浸人3mol/L的KOH溶液中狲钟，取出，用吹风机吹干溶剂后，在160°C下烘15min-20min，至TTx斑点呈黄褐色，然后，在可见（W灯，460nm）或紫外D2灯，230nm或278nm）光下扫描测定其吸光度，或者在365nm（Hg灯，滤光片400nm）激发光下测其荧光，扫描原始数据被储存，可能随时调出，根据不同需要采取不同的方式进行处理。采用外标面积校正法对TTX进行定量。3结果TTX样品量在40ng-1200ng之间，响应信号（不论是激发荧光信号，还是吸收信号）与样品量之间存在着良好的线性，其线性回归方程为Y=37．1＋1.8X，相关系数r=0．9995。校正线基本通过原点。最小可检测量不高于20g。对样品量水平在线性范围内TTX的重复测定（至少五次）的板内相对标准偏差一般都在士3.0℅以内，而板间相对标准偏差则不大于士5.0℅，标准添加法测得的TTX 回收率为104.0℅(RSD2.8℅，n=5)。TLC法与高效液相色谱法对同一样品的测定结果具有很好的一致性。4.结论建立了TTX的薄层色谱定量分析方法。由于TTX的结构与理化性质上的特殊性，一直给其分析检测带来麻烦。薄层色谱技术本身固有的一些特点，使其比任何以往的分析方法能够更好地解决TTX检测和测定中所遇到的问题。该方法简单易行、方便灵活、灵敏度高、重复可靠，适合于痕量TTX的定量分析，将在TTX的资源调查、TTX及其衍生物的研究。以及TTX药用开发中的质量控制分析等方面，发挥其重作用。