活血化瘀中药活性成分丹参酮ⅡA调节缺氧抑制人结直肠癌血管新生

摘要

目的:研究活血化瘀中药活性成分丹参酮ⅡA调节HIF-1 α抑制HCT-116细胞促血管生成因子的表达及对HUVECs管腔形成的抑制作用.方法:CCK-8法检测丹参酮ⅡA对常氧和缺氧条件下HCT-116细胞增殖抑制作用及对HUVECs细胞增殖的作用,ELISA法检测丹参酮ⅡA对过表达HIF-1α及干扰HIF-1α后细胞上清中VEGF、bFGF表达的影响,流式免疫荧光法检测丹参酮ⅡA对HIF-1α蛋白表达的作用.将与HCT-116细胞培养上清共培养的HUVECs细胞分为空白组和1μM、2.5μM、5μM、10μM丹参酮ⅡA组,处理后分别检测HUVECs细胞的管腔形成和体外迁移作用.结果:丹参酮ⅡA对常氧条件下HCT-116细胞24h、48h、72h的IC50值分别为(30.7±1.52)μM、(13.3±0.56)μM和(5.1±0.55)μM,而低氧条件下分别为(8.4±1.09)M、(2.1±0.18)μM和(0.99±0.17)μM.Tan ⅡA对缺氧下HCT-116细胞HIF-1α表达有较强的抑制作用,呈剂量依赖关系,同时,丹参酮ⅡA通过介导细胞中HIF-1α的表达而抑制VEGF和bFGF的表达.丹参酮ⅡA对HUVECs细胞血管环的形成有明显的抑制作用,10μM丹参酮ⅡA能完全消除肠癌细胞培养上清液对HUVECs血管环形成的促进作用.结论:丹参酮ⅡA通过调控人结肠癌细胞HIF-1α水平抑制细胞促血管生成因子表达,并对与肿瘤细胞共培养的HUVECs血管形成有明显的抑制作用.