模拟微重力诱导成骨细胞微丝变化对一氧化氮/一氧化氮合酶系统的影响

摘要

目的:研究模拟微重力诱导细胞微丝结构变化对一氧化氮/一氧化氮合酶(NO/NOS)系统的调控作用,探讨失重导致骨质疏松的机制.方法:本研究以小鼠成骨样细胞株(MC3T3-E1)作对象,以四转器模拟微重力效应.实验将细胞分为4组:模拟微重力组、5μg/ml细胞松弛素B组、模拟微重力+0.5 μg/ml细胞松弛素B组及对照组正常重力组.培养48 h后,利用FITC.Phallacidir进行免疫荧光染色.在激光共聚焦显微镜下观察各组细胞微丝的变化;同时使用NOS分型试剂盒测定各组细胞NOS的酶活性,通过硝酸还原酶法检测各组细胞培养液中NO浓度.结果:除了正常重力组外,其余各组呈现不同程度的细胞微丝结构解聚,张力纤维减少,且排列紊乱,以模拟微重力+0.5μg/ml细胞松弛索B组改变最为明显.与正常重力组相比,其余各组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的酶活性和NO的浓度均提高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的酶活性则有所下降,均以模拟微重力+0.5μg/ml细胞松弛素B组变化最为明显.结论:推测微重力诱导细胞骨架微丝解聚,可以调控NO/NOS系统而影响信号传导.