SMAP-29抗菌肽的原核表达、纯化及活性检测

摘要

根据大肠杆菌偏好的密码子优化smap-29基因序列,并在目标肽N端添加肠激酶识别位点,C端添加终止密码子,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切位点连接到pET-28a(+)上构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达出带有6×His标签的融合蛋白,利用Ni-NTA亲和层析纯化、肠激酶切割后释放出具有天然末端的SMAP-29重组肽,对测试菌显示出抗菌活性,为其功能及应用研究提供了原料。