钉螺体内线虫的分子鉴定

摘要

为检获日本血吸虫中间宿主钉螺中的尾蚴,从云南日本血吸虫病流行疫区洱源、巍山等地采集了6000只钉螺,将钉螺洗净、压碎、弃壳后,显微镜检,发现2260只钉螺的软体组织中均有线虫(见附图),钉螺荷虫强度为2～60.为进一步明确钉螺中所发现的线虫的分类地位,分离洗净线虫、消化、提取DNA,采用引物JB3和JB4,扩增线粒体细胞色素C氧化酶第Ⅰ亚基(COX1)基因序列,采用通用引物V5367和26S,扩增核糖体DNA第一、第二内转录间隔区(ITS-1,ITS-2)基因序列,扩增产物直接进行测序,再对序列进行网上比对分析,结果,COX1基因序列长度为413bp,与Caenorhaboditis.sp.5的相似度为92％;ITS-1长度为443bp,与双桅隐杆线虫的相似度为99％,ITS-2长度为342bp,与C.briggsae的相似度为96％.分子鉴定结果表明,从云南钉螺里发现的线虫为广杆属的双桅隐杆线虫(C.briggsae).该线虫是如何进入钉螺体内,为何选择钉螺作为其共生或寄生的宿主,以及钉螺和该线虫的互作机制等问题有待进一步研究.