国槐木材DNA三种提取方法比较研究

摘要

探寻从木材不同部位组织中提取高质量DNA的合适方法。为今后从DNA分子生物学水平鉴定木材、确定木材地理起源、保证有序木材贸易以及森林认证等应用提供技术基础。以气干国槐木材为原料,分别采用改良的CTAB法、QIAGEN试剂盒法、PTB法,提取边材、心边材过渡区和心材部位的DNA,比较不同部位木材组织DNA提取的数量和质量差异,并PCR扩增。改良的CTAB法提取的DNA浓度变化范围为28.52-491.59ng/μaL,改良的试剂盒法提取的DNA浓度变化范围为8.55-30.85ng/μL,改良的PTB法提取的DNA浓度变化范围为135.88-240.80ng/μL。三种方法提取三个部位的DNA的OD260/280和OD260/230值,从边材经心边材过渡区到心材部位逐渐降低。改良PTB法所提取的DNA经纯化后均能成功扩增出Matk,rbcL,trnH-psbA,ITS四条DNA条形码序列。三种方法都能成功提取三个部位DNA,经纯化后均能满足PCR反应要求。改良的CTAB法能最有效地提取边材和心边材过渡区DNA,改良的PTB法能更稳定地提取心材DNA。