慢病毒导入的DC表面CLRs过表达或CLRs siRNA对滋养细胞生物学行为的影响

摘要

目的:采用基因克隆技术构建CLRs过表达/siRNA慢病毒载体感染胎盘来源的DC,探讨其对人滋养细胞侵袭力、粘附力及凋亡率的影响.方法:1.获取感染过表达CLRs基因慢病毒的DC和感染CLRs基因siRNA慢病毒的DC;2.人原代绒毛外细胞滋养细胞与感染过表达CLRs基因慢病毒的DC(CLRs基因过表达组)或感染CLRs基因siRNA慢病毒的DC(CLRs基因沉默组)共培养,以滋养细胞与未感染慢病毒DC共培养作为对照组;3.体外侵袭试验检测共培养前后滋养细胞的侵袭能力;4.AnnexinV/PI双染法检测共培养前后滋养细胞的凋亡情况;5.粘附能力实验检测共培养前后滋养细胞的粘附能力.结果:1.侵袭能力:与对照组相比,CLRs基因沉默后滋养细胞的侵袭能力明显减弱(P＜0.01);2.凋亡率:与未感染慢病毒的DC组相比,凋亡率明显增加;3.粘附能力:与对照组相比,DC细胞CIRs基因敲除后对滋养细胞粘附能力明显下降(P＜0.01).结论:DC表面CLRs基因敲除后,滋养细胞表现为凋亡率增加,侵袭能力及粘附能力明显减弱,提示DC表面CLRs基因是滋养细胞免疫损伤和子痫前期发病的重要机制之一.