体外犏牛胚胎生产与胚胎移植研究

摘要

本研究旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果.通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力.结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排除率增加,A级卵母细胞培养24h第一极体的排除率显著高于B级和C级卵母细胞,但相同体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排除率差异不显著.用Percoll液梯度离心法和BO液洗涤法分别处理牦牛精液和黄牛精液后通过种间体外受精,BO液洗涤法处理的精液受精后的卵裂率显著高于Percoll液梯度离心法处理精液受精后的卵裂率,而两种方法处理精液受精后其囊胚率差异不显著.两种方法(黄牛♀×牦牛(♂)vs.牦牛♀×黄牛(♂))生产的早期犏牛胚胎用输卵管上皮细胞共培养和卵丘细胞共培养其囊胚率和孵化囊胚率都显著高于SOF液培养,而3种培养方法培养的早期犏牛胚胎的卵裂率差异不显著.两种IVF胚胎冷冻解冻后形态正常胚(90.52％±5.94％vs.91.53％±7.34％)、24h的存活率(61.45％±8.44％vs.64.72％±11.82％)和48h的存活率(44.81％±6.21％vs.48.47％±10.04％)均差异不显著.将黄牛♀×牦牛(♂)IVF犏牛胚胎移植到自然发情4头受体黄牛和3头受体犏牛,四头牛怀孕并产犊,妊娠率为57.14％,平均妊娠期258d。