慢性酒精暴露后不同戒断时间点Wistar大鼠纹状体NR2B表达的变化

摘要

目的:观察慢性酒精暴露后Wistar大鼠不同戒断时间点纹状体N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体2B亚基(NMDA receptor2B subunit,NR2B)表达的变化. 方法:72只雄性Wistar大鼠,随机分为6组,分别为:戒断2h组、戒断6h组、戒断12h组、戒断1d组、戒断3d组和正常对照组,每组12只.5个戒断组大鼠自由饮用6％(v/v)的酒精水溶液16周,正常对照组饮用净化水16周.戒断组分别于末次饮酒后2h、6h、12h、1d、3d时,正常对照组于末次饮水后2h时,评估戒断症状后处死取纹状体,采用免疫荧光法和western blot检测各组大鼠纹状体NR2B蛋白含量的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠纹状体NR2BmRNA的表达. 结果:与正常对照组戒断评分[(1.50±0.80)]相比,戒断2h、6h、12h、1d、3d组大鼠戒断评分［(10.42±2.50)、(15.42±1.93)、(9.25±2.01)、(7.67±1.92)、(2.25±0.87)］均增高(P＜0.05),戒断6h组评分最高;与正常对照组大鼠纹状体NR2B荧光表达强度［(2210.00±178.20)］、NR2B蛋白表达水平［(0.150±0.009)］及NR2BmRNA表达水平［(0.006±0.001)］相比,戒断2h、6h、12h、1d组NR2B荧光表达强度［(2710.56±194.21)、(5035.16±234.41)、(3326.23±378.16)、(2570.64±177.88)］、NR2B蛋白表达水平［(0.192±0.008)、(1.649±0.205)、(0.783±0.109)、(0.180±0.009)］及NR2BmRNA表达水平［(0.026±0.002)、(0.351±0.034)、(0.248±0.023)、(0.024±0.003)］均有明显增高(P＜0.05),且随着戒断时间的延长,表达逐渐上升,至戒断6h达到高峰,其后开始下降,戒断3d恢复至基线水平(P＞0.05);戒断评分与NR2B荧光表达强度(r=0.833,P＜0.01)、NR2B蛋白表达水平(r=0.746,P＜0.01)及NR2BmRNA表达水平(r=0.725,P＜0.01)均呈正相关. 结论:慢性酒精暴露后不同戒断时间点,Wistar大鼠纹状体NR2B表达上调,NR2B蛋白和NR2BmRNA表达与戒断症状呈正相关,调控NR2B表达可能是治疗酒依赖戒断症状的新靶点.