快速冷冻切片染色机在病理科的应用进展

摘要

术中快速病理诊断在临床应用越来越广泛,该技术是将手术台上切下的病变组织在冰冻世片机中迅速冷冻后制成切片,经过染色和显微镜下观察后进行病理诊断.一般在三十分钟内发出诊断性报告,为进一步临床手术治疗方案的确定提供参考意见.随着精准医疗时代的到来，病理染色技术的质控要求越来越高。高质量的HE染色是病理诊断和后续进行免疫组织化学、分子检测和精准医疗的重要基础，全自动冷冻切片染色机可以提供较手工染色更优质更稳定的染色切片，因此全自动冷冻切片染色机替代人工手动染色将是病理技术室标准化平台建设的发展趋势。全自动冷冻切片染色机是专门为术中快速冰冻而设计的染色机，与常规自动染色机工作原理相似，设置染色时间决定切片在每缸染液和水中的停留时间，但其具备独特的功能。自动冷冻切片染色机在苏木素和饱和碳酸铿溶液位置设置了加热功能，染色温度相对恒定。冬天时科室缺乏暖气，光是靠空调的制暖效果无法使染液达到染色最佳温度。在传统手工染色时，苏木素温度过低，细胞核小容易着色，影响染色效果。使用酒精灯烤片直接加热，导致切片受热小均匀，温度小易控制，结果经常会出现细胞质、细胞核染色深浅小一，染色小够鲜艳，对比小明显，细胞核染色呈“灰蓝色”等问题，时常出现掉片等现象，直接影响病理诊断。由于医院发展规模小断壮大，手术标本日渐增多，一个病理技术员无法满足术中快速标本地需求。工作中经常出现同一时问段送检多份术中冷冻标本的情况。按照三甲医院标准规定，一份快速冷冻标本要在三十分钟内出病理结果，而技术员要在十五分钟内完成取材记录和制片任务，如采用手工染色技术，则需要另一个技术员协助下一份取材记录。使用自动染色机后，技术员可以一个人独立完成两份冷冻制片同时进行。即当医生取下冰冻组织时，技术员可以对冰冻组织进行速冻和制片，然后将切完并固定好的切片上机染色，在染色过程中，技术员可以进行下一份冰冻标本的记录，待记录完成时，染色程序也已经结束，技术员可以先速冻组织，然后再将染好的冰冻切片取出，用吹风筒吹干玻片，中性树胶封片，核对切片信息并交给医生阅片后再接着下一份切片。技术员可以及时处理同一时问段送来的多份冷冻标本，病理医生就能及时、准确的发出快速冷冻病理报告全自动冷冻切片染色机的各步骤由计算机控制，各步骤所设定的时问精准，小会因操作者的小同而出现明显的波动。而手工染色由于涉及多人操作、多个操作步骤，小可避免地会出现个体差异，总会小同程度地影响染色效果，导致同批次染色效果小一致的现象。虽然自动冷冻切片染色机解决了工作中很多难题，同时也产生了新的问题。科室引进全自动冷冻切片染色机时，开始染色效果小尽如人意，表现为肉眼观切片背景着色深CT包埋剂附着在组织周围，镜卜发现苏木素结晶较多，严重影响病理医生的诊断。经过小断的探索发现，是由于水压小够，在自来水冲洗时未能把组织周围的包埋剂冲掉就直接进入苏木素，使其染色，在苏木素之后也未能冲掉多余的苏木素而出现的现象。解决方法就是在入水口安装加压器，染色时较大的水流可以冲掉多余的杂质，并及时清理染色缸内的污垢，这样便能保证染色质量。在实际工作中，自动冷冻切片染色机的利大于弊，技术员只需结合科室自己的试剂和工作环境，制定合理的染色程序及试剂更换程序，便能做出质量好的冷冻切片。它避免了人工染色中的随意性、工作效率低、质量小稳定等因素的影响，逐渐为各大医院病理科及相关实验室所接受并使用。