山羊KLF9基因的克隆及组织细胞表达谱

摘要

Kruppel样转录因子家族(KLFs)是一类具有锌指结构(一般为3个)的转录因子,通过与DNA的CACCC元件和富含GC区连接,从而调控转录激活或抑制,且对机体的生长发育等具有重要作用.KLF9最初从大鼠肝脏cDNA文库中分离,有研究表明其参与脂肪细胞分化过程的调控,并且可能影响IMF等动物肉品质形状.因此本研究以我国第二个国家级肉用山羊新品种简州大耳羊为研究对象,在克隆得到山羊KLF9基因序列的基础上,阐明其组织表达谱,测定其在前体脂肪细胞各个诱导分化阶段的表达量,以期为阐明KLF9在调控山羊肌内脂肪沉积中的作用奠定基础.KLF9基因在山羊组织与细胞相对表达量的测定结果均指向其与脂肪代谢密切相关。由KLF9基因在简州大耳羊脂肪中的高表达，推测可能与简州大耳羊作为一个肉用山羊品种的长期定向育种有关，同时揭示KLF9可能参与脂肪沉积。山羊KLF9基因在肌内前体脂肪细胞中的相对表达量呈先上升后下降的趋势，峰值在第2天出现，并且第2天的相对表达量极显著高于未诱导分化的前体脂肪细胞中的表达水平，基于上述结果推测山羊KLF9基因可能在肌内前体脂肪细胞分化早期发挥调控作用，下一步本实验室将构建超表达和干扰载体体外转染培养的细胞来进一步证明其调控的作用机制。