超高效液相色谱串联时间飞行质谱法测定尿液中的酪氨酸及其代谢产物

摘要

本文使用超高效液相色谱串联时间飞行质谱仪(UPLC-TOF MS/MS)，建立了一种简单、快速且灵敏度高的尿液中酪氨酸及其六种代谢物的定性定量分析方法。尿液经离心、稀释和过滤后直接进UPLC-TOF MS/MS系统分析。采用Shim-pack GIST C18柱分离，以乙腈：20mM乙酸-乙酸铵（pH=5.7）=5:95(v/v)为流动相，流速0.2mL/min，通过电喷雾离子化，以多反应监测（MRM）方式进行检测。在优化的色谱及质谱条件下，Tyr的线性范围为0.125-6mg/L，PHPLA的线性范围为0.025-1.2mg/L，PHPAA的线性范围为0.5-24mg/L，DOPA、HGA、PHPA和TA的线性范围为0.0625-3mg/L，线性相关系数在0.9993-0.9998之间，检测限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）范围分别为0.003-0.081mg/L和0.010-0.270mg/L，回收率在85.5％-110.0％范围内，RSD（n=6）为0.8％-4.7％。该方法简单、快速、选择性强、灵敏度高，可用于人体尿液中酪氨酸及其代谢产物的同时测定，结果令人满意。本文为以后更深入的研究酪氨酸及其代谢产物与某些特定癌症的关联性提供了很好的参考。