鸡毒支原体耐热核酸酶MGA_0676原核表达及性质鉴定

摘要

鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,M.gallisepticum)是引起鸡呼吸困难、气囊炎等症状的慢性呼吸道疾病的病原体.支原体核酸酶是支原体重要的毒力相关蛋白,在支原体致病过程中发挥重要作用.为研究鸡毒支原体的耐热核酸酶,本研究将鸡毒支原体MGA_0676蛋白进行序列分析及原核表达后,通过核酸酶切试验及酶谱试验对其核酸酶活性进行鉴定,结果发现MGA_0676蛋白具有一个链球菌耐热核酸酶(staphylococcal nuclease,SNC)功能区,原核表达的rMGA_0676蛋白可以降解质粒DNA、单链DNA及宿主细胞的核酸底物,具有Ca2+依赖性,在37℃及49℃具有较好的酶切活性,缺失SNC区的rMGA_0676△SNC蛋白不能降解核酸底物,这表明MGA_0676蛋白是鸡毒支原体具有Ca2+依赖性耐热核酸酶,其核酸酶功能区为SNC区域.研究结果将为鸡毒支原体耐热核酸酶致病机理的研究奠定基础.