猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株NSP9基因的反向遗传学替换改造

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒对养猪业危害巨大,未有有效的药物和疫苗,猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因编码RNA依赖的RNA聚合酶,在病毒复制中发挥重要作用.为了探索NSP9基因与病毒的毒力、复制能力及细胞嗜性的相关性，本研究利用反向遗传学技术将疫苗毒CH-lR的NSP9基因进行克隆，酶切后连接到强毒株XH-GD的感染性克隆上，进行病毒的拯救。结果成功构建替换了CH-lR NSP9基园的重组病毒。对重组病毒的生物学特性进行研究，发现拯救病毒的生长速度和病毒滴度明显高于亲本毒株XH-GD，但是低于疫苗毒CH-IR，重组毒株的噬斑大小与CH-IR相似，初步推测疫苗株CH-IR的聚合酶有助于提高病毒的滴度，为进一步研究NSP9基困对病毒毒力的影响奠定基础。