HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制

摘要

目的:探讨HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1表达调控的机制.方法:构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因,将其转染TaxP细胞,加入NF-κB抑制剂BAY11-7082或同等体积的DMSO,24h后收集细胞检测荧光素酶活性;TaxP细胞上清中加入BAY11-7082或同等体积的DMSO,24h后,免疫印迹检测EGR-1蛋白表达;将Tax及其突变体M22和M47分别转染293T细胞,24h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达.结果:成功构建了不同长度及突变体的EGR-1调控序列荧光素酶报告基因;荧光素酶报告基因检测显示,相对于E1、E2而言,E3、DelE、MutE的荧光素酶活性明显降低,加入BAY11-7082后,E1、E2的荧光素酶活性明显降低(P＜0.01),而E3、DelE、MutE无明显变化;免疫印迹检测显示,加入BAY10-7082后,EGR-1蛋白表达明显降低;相对于野生型和M47,转染M22突变体后,293T细胞EGR-1蛋白表达明显降低.结论:NF-κB是Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控的关键核因子.