牙龈卟啉单胞菌在影响牙周细胞增殖的机制研究

摘要

牙周炎是由牙菌斑微生物引起的牙周支持组织慢性感染性疾病,是我国成年人丧失牙齿的首要原因.牙菌斑微生物膜中存在多种牙周致病菌,是引发牙周炎的始动因子.牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis),为革兰氏阴性专性厌氧菌,是重要牙周致病菌之一.人类牙龈上皮细胞(Human gingival epithelial cells,HGECs)是牙周组织防御的第一道天然屏障.P.gingivalis及其产物与HGECs之间的相互作用,是P.gingivalis感染牙周组织至关重要的一步.体外实验发现,P.gingivalis感染宿主细胞后,可以通过干扰宿主细胞信号传导的相关蛋白表达,对宿主细胞周期、凋亡、分化等重要生理过程进行严密调控.通过建立P.gingivalis感染HGECs模型，CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞周期的变化，基因芯片方法筛查P.gingivalis感染后细胞差异表达基因，Real-time PCR和western blot检测细胞周期调控因子基因和蛋白表达变化。建立skp2和p21基因缺陷细胞，检测P.gingivalis感染牙龈上皮细胞后，CDK4/6的表达变化，及对细胞增殖和细胞周期的影响，探讨p21蛋白参与P.gingivalis感染牙眼上皮细胞对细胞周期调控的机制，也为选择潜在的牙周病治疗的分子靶点提供一些理论依据。