枇杷CCoAOMT基因的克隆及其在果实低温贮藏过程中的表达

摘要

为了解枇杷(Eriobotrya japonica Lind1.)咖啡酰CoA氧甲基转移酶基因(Caffeoyl-Coenzyme A3-O-methyltransferase,CCoAOMT)在低温储藏过程中与其果实木质化的关系,首先从外观上对贮藏不同时期的枇杷'早钟6号'、'解放钟'果实进行观察,并通过5'-RACE、3'-RACE及巢式PCR相结合的方法获得'早钟6号'CCoAOMT基因的编码区(CDS)序列,再利用RT-PCR从mRNA水平对其在低温贮藏的两种枇杷果实中的表达情况进行了半定量分析.发现枇杷CCoAOMT基因的CDS区全长744bp,编码247个氨基酸(GenBank登录号:JX885583);序列比对分析表明该基因含有CCoAOMT类蛋白特有的8个保守序列元件,与其它物种上报道的该类蛋白具有很高的同源性;在整个低温储藏过程中,两种枇杷果实外观的变化并不明显;但是RT-PCR的半定量分析表明枇杷果实中CCoAOMT基因在4℃贮存的初期转录水平上调,之后随着贮存时间的延长而有所下降.上述结果表明枇杷CCoAOMT基因很可能在低温贮藏枇杷的木质化过程中发挥作用,低温处理可能影响其在果实中的表达.