诊断超声击破微泡靶向开放BBB促MSCs归巢并修复大鼠脑缺血

摘要

目的：研究旨在探索诊断超声击破自制脂质体微泡无创、靶向开放大鼠血脑屏障(BBB)促MSCs归巢并修复大鼠脑缺血的可行性与有效性. 方法：诊断超声直接经大鼠颅骨辐照,并将实验大鼠分为对照组(脑缺血组)、超声+微泡组、静脉移植MSCs组及超声+微泡+MSCs组.微泡与MSCs经静脉注入,通过伊文斯兰与硝酸镧外渗评价超声联合微泡辐照后大鼠BBB开放情况;荧光示踪定位MSCs经血管跨BBB迁移归巢脑实质全过程,分别在MSCs移植后1,4,7及14天观察并计数各组MSCs数量,进行组间统计学分析与比较.在不同时间点采用HE染色对超声辐照脑缺血局部血管密度进行计数以评价血管新生情况.通过前肢肌力实验、平衡木实验等对超声联合微泡促MSCs移植后脑缺血大鼠的神经功能与行为学进行评分，并进行组间统计学比较，P<0.05为差异具有统计学意义。 结果：超声辐照侧大鼠脑缺血区可见一定程度的硝酸镧与EB外渗，提示大鼠BBB得到靶向和有效开放。荧光显微镜观察发现MSCs主要位于超声辐照侧脑缺血部位的大脑皮层、海马等区域，超声联合微泡介导MSCs移植组荧光细胞数量显著性高于单纯经静脉MSCs移植组（P<0.05）。荧光显微镜记录了MSCs自血管跨BBB进入脑组织的全过程包括粘附贴壁、迁移及跨过血管壁等。诊断超声击破微泡后脑缺血区新生血管密度高于其余各组，神经功能得到有效改善，组间比较差异具有统计学意义，P<0.05。 结论：诊断超声击破自制脂质体微泡经大鼠颅骨辐照能无创有效开放BBB并成功促MSCs颅内靶向转运，在超声生物学效应与MSCs共同作用下促进脑缺血区血管新生及神经功能改善，有望为颅内疾病的安全有效治疗提供新思路。