微囊藻毒素ELISA检测方法的建立与评估

摘要

我国是世界上藻灾最为严重的国家之一，藻毒素严重威胁居民饮水安全和食品安全。我国主要的淡水藻毒素是微囊藻毒素(Microcystin，MC)，微囊藻毒素是淡水蓝藻产生的一类生物活性物质，能够对人体多个器官产生危害，危害最严重的靶器官是肝脏，长时间低剂量接触MCs会导致肝损伤和诱发癌症，有研究表明，我国肝癌多发区与当地水中高含量的微囊毒素有关；Mcs引发的急性肝中毒症状表现为肝细胞损伤、肝出血。采用制备的微囊藻毒素(MC-LR)单克隆抗体制备包被抗原,建立MC-LR的ELISA检测方法.该方法定量检测区间LQD为0.20～4.00μg/L,最低检测限LOD为0.10μg/L,最高检测限HOD为8.00μg/L,最佳包被抗原浓度为0.5μg/mL,对应抗体稀释度为1∶20000左右,酶标二抗工作稀释度选择为1∶6000;应用该方法对加标水样进行检测,综合回收率为(98.0±10.7)％,各样品检测结果变异系数均小于10％,EHSA方法准确度良好,精密度优良.