蓝莓休克病毒的提取与RT-PCR快速检测方法建立

摘要

根据已报道的蓝莓休克病毒(Blueberry shock virus,BIShV)外壳蛋白基因序列设计特异性引物,以提取的病毒RNA为模板,研究并建立RT-PCR快速检测方法,并对福建省采集的蓝莓休克病疑似病例进行检测.结果表明,建立的RT-PCR方法具有良好的特异性,能够从感染BIShV的样品上扩增出与预期大小相符的特异性目的片段,而从其他蓝莓病毒及健康样品上未扩增到相应片段.RT-PCR产物序列测定结果进一步证实,目的片段序列为BIShV序列,与已报道的BIShV序列同源性达97％.通过对田间采集的蓝莓休克病疑似病例样品进行BIshV检测,确认了福建蓝莓已发生该病,验证了该检测方法的实际应用效果.