建立一种基于截断鸭坦布苏病毒E蛋白的间接ELISA方法

摘要

本研究以鸭坦布苏病毒E蛋白的主要优势抗原表位区E1蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭坦布苏病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.优化后确定了最佳的抗原包被浓度为0.774mg/L,血清的最佳稀释度为1:100,酶标二抗的稀释度为1:6000.特异性表明,用建立的ELISA方法对禽流感、新城疫病毒、1型鸭肝炎病毒、胰腺型鸭甲肝病毒、禽霍乱和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清进行检测,均未发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10％;敏感性达1∶3200.该方法与以全病毒为包被抗原的间接ELISA检测结果相关性达到95.1％.利用该方法对237份来自福建省开产麻鸭的血清样品进行检测表明,其血清阳性率达77.9％,表明福建省开产麻鸭感染鸭坦布苏病毒阳性率很高.