不同固定剂对体外培养微血管内皮细胞四种凝集素着色模式的影响

摘要

本试验以体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MVECs)为对象,研究了7种固定剂对4种凝集素荧光染色特点的影响.结果显示,ConA和WGA在任一种固定剂处理的MVECs均为强阳性着色,荧光分布呈2种模式,Zenker's液、高碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛(PLP)溶液、2.5％戊二醛(GA)和4％多聚甲醛(PFA)固定时,细胞质和细胞膜均有荧光分布,且细胞膜荧光着色强于细胞质;95％乙醇溶液、Rossman's液和丙酮固定时,荧光仅分布于细胞质.其中,丙酮固定时ConA和WGA荧光着色最弱,且迅速淬灭.DBA和UEAI仅在2.5％GA和PLP溶液固定时可见细胞质内散布有极微弱荧光.研究表明,固定剂显著影响MVECs的凝集素荧光染色,含醛类物质和升汞成分的固定剂适于细胞膜糖链的检测,含乙醇的固定剂适于细胞质糖链的检测,丙酮不适于MVECs的凝集素荧光染色.