大菱鲆Lmp7基因克隆及表达分析

摘要

蛋白酶体是一个大型的,负责细胞内蛋白质降解和代谢类的家族.它与主要组织相容性复合体(MHC)分子结合形成肽聚合物蛋白酶复杂体系从而发挥重要作用.这份研究报告确定了大菱鲆的蛋白酶体亚基的一个新成员.该蛋白酶体亚基的全长cDNA序列已经获得,该cDNA含有一个117bp的5'非编码区,825bp的开放阅读框(ORF)和330bp的3'非编码区.3’端非编码区包含在一个典型的多聚腺普酸化终止密码信号(AATAAA)，之后是一个长24by的poly(A)尾巴。通过密码子分析发现开放阅读框编码274个氨基酸。序列分析表明，其主要结构与其他脊椎动物的LMP7序列高度相似。实验还同时考察了在经受不同病原体感染后，LMP7表达水平和免疫反应之间的关系。定量R丁一PCR表明LMP7在各种组织中的差异表达:其在脾，肝，肌肉和皮肤中，分别有不同程度的高表达。在感染牙虾淋巴囊肿病毒96小时后，LMP7表达在大菱虾的肝脏、肾脏、脾脏达到最高。在12h的鳗弧菌感染过程中，分别在大菱虾的肝，肾，脾检测到LMP7的高表达。此外，LMP7的表达在大菱虾肾细胞(TK)感染鳗弧菌24h和感染LCDV96h后也明显增加。这些结果表明，大菱虾LMP7蛋白参与大菱虾的免疫反应，并可能会起到显着的免疫调节作用。