鲑鱼降钙素在链霉菌中的分泌表达

摘要

利用聚合酶链式反应（PCR）技术分别扩增鲑鱼降钙素的编码序列（sCT-GIy）和抗生链霉菌melcl的信号肽编码序列及其上游的调控序列，将鲑鱼降钙素编码序列融合在melcl信号肽编码序列后定向克隆到链霉茵质粒载体pIJf680中的新霉素磷酸转移酶基因的启动子（Paph）下游，得到的表达质粒pMS680 转化变铅青链霉菌（Streptomyces lividans TK54）进行分泌表达，酶联免疫测定法（EIA）显示重组菌株在YEME培养基中的分泌表达水平于96小时达到最高，表达量大于100ug／L培养液，实验表明表达产物能降低大鼠血清钙的浓度。高压液相色谱（ＨＰＬＣ）结果表明产生产物中主峰的保留时间与鲑鱼降钙素标准品的保留时间基本一致。以上结果提示，鲑鱼钙素在链霉菌中获得了成功的分泌表达。