大肠杆菌色氨酸酶基因的克隆与表达

摘要

应用PCR技术从E.coliJM105中扩增出长约1.4kb的色氨酸酶基因，将其插入高表达载体pET3a的NdeI/BamHI位点中，转化宿主菌E.coliBL21（DE3），构建高产色氨酸酶基因工程菌。SDS-PAGE电泳和薄层扫描表明，工程菌色氨酸酶的表达量占细胞总可溶性蛋白的69.8℅。酶活测定结果表明，7株工程菌色氨酸酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高，其中WW-11号比缩主菌高16倍。