东北红豆杉细胞悬浮培养过程中内切壳聚糖酶基因的诱导表达

摘要

以悬浮培养的红豆杉(Taxus cuspidata)细胞为材料,外源加入10μM的紫杉醇,能够诱导细胞发生程序化死亡.核酸电泳显示总DAN发生特异性降解并形成180bp及其整数倍的DNA梯带(DNA ladder).用末端脱氧核酸转移酶介导的dUTP标记法(TUNEL)检测发现断裂DNA的3-OH端被原位特异标记.同时针对程序化死亡的细胞运用DDRT-PCR技术来显示特异表达的基因,测序结果表明有两个基因片段都编码内切壳聚糖酶,但其同源性与已知的植物(如:烟草、水稻)为低.