三基因重组大肠杆菌产聚β-羟基丁酸酯的补料分批培养

摘要

VG1(pTU14)是一株同时引入透明颤菌血红蛋白基因(vgb)、λ噬菌体裂解基因(S-RRz)和PHB合成基因(phbCAB)进行三基因重组的新建产PHB基因工程大肠杆菌.在VG1(pTU14)补料分批培养的过程中,可以通过溶氧(DO)和pH两个参数的变化来在线综合识别补料时间.C/N和DO是影响菌体生长和PHB积累的非常重要的参数:当C/N控制在5～25之间时,细胞大量积累;当C/N很高(大于30)或很低(小于3)时,PHB颗粒都大量积累;当发酵前期DO很低(小于5℅)时,也会造成细胞净生物量增长的停滞和PHB颗粒的大量合成.在适宜的C/N和DO条件下,对VG1(pTU14)进行60h的补料分批培养,菌体细胞浓度高达215.9g/L,PHB浓度高达193.7g/L,PHB占细胞干重的百分含量达到了89.7℅.