K562细胞转P16基因前后流变学特性的改变

摘要

用FuGene6介导抑癌基因,p16表达载体pBABE-puro-p16转染p16阴性的人红白血病细胞株K562,经药物筛选后,获得转基因K562(K562-p16).采用微吸管技术并配合某些生物物理技术,研究K562细胞在转基因前后生物流变特性的改变.结果表明,p16基因的引入使K562细胞表面电荷密度增加,其电泳率从0.76±0.02μm/s/V/cm增加到0.92±0.07μm/s/V/cm(p<0.05),表明p16基因也许通过影响细胞周期而影响细胞表面电荷,进而抑制肿瘤细胞与血管内皮细胞的粘附.K562-p16的抗渗透破碎能力变差,则说明外源p16基因的引入使K562细胞向容易被破坏的方向转化.用标准固体粘弹性模型拟合微吸管实验结果后,发现表征细胞最大变形能力的弹性系数K<,1>增加(19.9±12.8N/m<'2>增加为24.7±10.9N/m<'2>,p<0.05),而另一弹性系数K<,2>和粘性系数μ无明显改变,说明p16使K562细胞刚性增大,这一方面使细胞转移较为困难,另一方面又使它在血流中被破坏的几率增大.这些结论从生物流变学角度上将加深对p16基因抑制肿瘤转移、以及基因治疗理论和实验的认识.