固相放射免疫分析及其在奶牛生产中的应用

摘要

本研究建立了一种运用孕酮单克隆抗体自包被固相放免分析法(Self-coating RIA Using Progesterone Mono-clonal Antibody,Sc-RIA)其灵敏度为0.06nmol/L,回收率达95.73﹪,批内CV6.8﹪,批间CV9.3﹪,与DPC有非常好的相关性.在研究中用90﹪乙醇作为固相样品-滤纸的抽提剂,得到滤纸样品中的<'3>-P<,4>和<'125>I-P<,4>回收率分别为95.01±0.80﹪和94.09±3.03﹪.应用所建立的Sc-RIA,测定了正常发情奶牛,配种后怀孕奶牛和卵巢疾病奶牛奶清和滤纸样品中的孕酮含量的变化.结果表明奶清样中的孕酮变化和滤纸样中的孕酮变化趋势一致.正常奶牛发情周期中,奶清样与滤纸样孕酮的相关系数r=0.8792±0.070,且测得周期天数完全一致,为22±2.18天.两者于同一天达到谷点,在谷点处,滤纸样孕酮和奶清样孕酮的平均浓度分别为1.6481±0.6023nmol/L和0.3184±0.2549nmol/L.配种后奶牛滤纸样与奶清样孕酮变化趋势一致,其相关系数为0.9178±0.0053.卵巢疾病奶牛奶清样和滤纸样孕酮变化的相关系数为0.62.Sc-RIA可于奶牛早期妊娠诊断.用奶清样测孕酮含量进行早期妊娠诊断,妊娠诊断准确率达89.47﹪,未孕诊断准确率达100﹪.用滤纸样测定牛奶中的孕酮含量进行早期妊娠诊断,妊娠诊断准确率达87.61﹪,未孕诊断准确率达95.47﹪.Sc-RIA还可用于监测奶牛的发情、排卵、黄体功能等各种繁殖生理状态,从而进一步地提高奶牛的繁殖率,提高牧场的经济效益.