实时定量检测肝癌组织中端粒酶hTERT基因表达

摘要

端粒酶活性是细胞永生化的关键步骤,人体绝大多数恶性肿瘤平均85％以上存在端粒酶活性,而在正常的组织中无端粒酶活性.在肝癌中端粒酶活性高达80％以上,活性一般较高,并且证实活性越高复发率也越高,同样在急慢性肝炎、肝硬化中发现有较低的端粒酶活性,因此,定量检测端粒酶活性对肝癌的诊断,预测肝癌术后的复发有重要的临床意义.目前检测端粒酶活性常用(telomeratic repeat amplification protocol,TRAP)法,但该法存在PCR产物污染导致假阳性、定量不准等问题.端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptanse,hTERT)或称端粒酶催化亚基已证实是端粒酶组分中最关键的限效因子,它的表达水平同端粒酶活性密切相关,定量检测hTERT基因的表达水平,可反映端粒酶的活性高低.采用新近出现的基因定量方法——实时定量RT-PCR方法,对50例肝癌及癌旁组织中的端粒酶hTERT基因表达水平进行了定量检测,结果表明实时定量RT-PCR能准确快速地检测hTERT基因表达水平,从而提供一种检测新的肿瘤标志基因的方法。