鸡白痢沙门菌—耐药质粒的分离与鉴定

摘要

耐药基因通常位于可移动元件上，携带耐药决定子的质粒是传播耐药性的重要途径，全基因组测序分析在耐药基因型确定和预测耐药表型中可能成为一种简单、快速和高效的方法，并且有较高的灵敏度和特异度。通过分析50株鸡白痢沙门菌的全基因组序列，获得一个新的耐药质粒pSPUR，目前在鸡白痢沙门菌中未见报道。该质粒仅存在于对氨苄西林的MIC值>512μg/mL的菌株(s9303，s9804，s98109，s09c6，s09c12，s09c13，s09c15)中。将s9804中的耐药质粒序列补充完整，其大小为42，895bp，用CGⅥew Server绘制质粒环状图，并利用NCBI Conserved Domain Search寻找该质粒的开放阅读框，进行功能注释。其上的耐药基因为bla TEM-1，含有IS1转座酶、IS240转座酶、Tn3转座酶和InsA转座酶四种转座酶。该质粒可能来源于以下两类质粒的重组，一类为：肠炎沙门菌pSE12-52质粒(GenBank：KT317614)、都柏林沙门菌pOU1114质粒(GenBank：DQ115387)、大肠杆菌pOLA52质粒(GenBank：EU370913)和志贺杆菌pLN12633质粒(GenBank：HE578058)，另一类为：都柏林沙门菌pMAK2质粒(GenBank：AB366441)、肺炎克雷伯氏菌pKPX-2质粒(GenBank：AP012056)、肠炎沙门菌pFORCT质粒(GenBank：CP009767)和大肠杆菌pAPEC-078-ColV质粒(GenBank：CP010316)，仍有一小部分来源未知。将s9804质粒电转化到大肠杆菌受体菌J53AzR中，与之相比，转化子J53(pSPUR)对氨苄西林的MIC值升高了512倍，对阿莫西林／克拉维酸和头孢唑啉也升高了256倍，而对其它药物影响不大。该质粒可不同程度升高对B-内酰胺类药物的MIC值。但该转化子J53(pSPUR)对p-内酰胺类药物的MIC值比供体菌s9804高得多，机制不明，需要进一步的研究。