禽流感病毒单克隆抗体的制备及其多肽表位的鉴定

摘要

以禽流感病毒H9N2亚型纯化病毒为抗原,免疫6~8周龄雌性Balb/C鼠,末次免疫后3天,分离脾细胞与鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,ELISA筛选和有限稀释克隆化后,获得了8株能稳定分泌抗AIV单克隆抗体的杂交瘤细胞株.经ELISA检测8株骨髓瘤细胞诱生小鼠腹小单克隆抗体的效价可达1:3.2×10<'4>~5.12×10<'5>.用纯化病毒蛋白抗原进行了SDS-PAGE及Western blotting试验,分析了所有单抗所对应的病毒多肽抗原,初步表明8株单抗至少针对禽流感病毒3个不同的抗原表位,其中3株是针对核蛋白NP的单抗,3株针对基质蛋白M1,1株沉淀40KDa蛋白带.