从一次性采血50ml到CIK足量回输方法探讨

摘要

目的：寻求有效方法使得一次性采血50ml制备的CIK(cytokine-induced killer,CIK)足以满足临床过继性细胞免疫治疗耍要。rn 方法：外周血单个核细胞(PBMC)从50ml外周血中分离后,分成A、B两组,分别应用A、B两种方法进行培养。A培养法应用干扰素-γ(IFN-γ)、CD3单克隆抗体(OKT3)、白细胞介素-2(IL-2)和植物血球凝集素(PHA)行常规培养．B培养法在A培养法的基础上于培养的第2天另外加入终浓度为10ng·ml-1的IL-4,1000U．Ml-1的GM-CSF。比较A、B两种培养方式下CIK的增殖速度、培养前后免疫表型变化和细胞周期分布情况及对白血病细胞株K562的杀伤活性。rn 结果：培养2周发现,应用B培养法可使CIK增殖倍数明显提高,最高可达840倍,与A培养法比较,差异显著,P<0．01;A、B两种培养方法所获CLK的免疫表型、细胞周期分布情况及对白血病细胞株K562的杀瘤活性经统计学处理差异无显著意义,P>0．05。rn 结论：CIK培养的第2天在加入OKT3、IL-2、PHA的基础上再加入IL-4、GM-CSF可使CIK得率更高,细胞总数在5×109以上,从而使得一次性采血50ml制备的CIK足以满足临床回输治疗需要。