屋尘螨DNA疫苗的构建及其免疫原性研究

摘要

目的：构建屋尘螨Derp2DNA疫苗(pDerp2),并观察pDerp2的免疫原性. 方法：将编码屋尘螨主要变应原Derp2的基因向克隆到pcDNA3.1中,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测pDerp2在小鼠骨骼肌的Derp2基因mRNA表达;在大肠杆菌中(BL21)诱导表达Derp2重组蛋白,用镍亲和柱层析法提纯重组蛋白;将24只Balb/c小鼠随机分为重组Derp2(A组)、pDerp2疫苗组(B组)、pcDNA3.1组(C组)和对照组(D组).分别用pDerp2及重组蛋白对小鼠进行了免疫,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中IgE、IgG1与IgG2a抗体变化. 结果：成功构建了pDerp2,并能在小鼠骨骼肌表达;同时成功表达、纯化Derp2重组蛋白;A组IgG1抗体为(1.48±0.99),IgG2a抗体为(0.56±0.03),IgE抗体为(0.28±0.01),分别与D组相比P＜0.01;B组IgG1抗体为(0.45±0.18),IgG2a抗体为(0.65±0.03),与D组相比P＜0.01,IgE抗体为(0.04±0.01),与D组相比P＞0.05;C组IgE(0.03±0.01)、IgG1(0.06±0.02)与IgG2a(0.06±0.02)抗体,与D组相比P＞0.05. 结论：pDerp2能明显诱导小鼠产生IgG2a抗体,与较低水平的IgG1抗体,几乎无IgE抗体的产生。