体外诱导胚胎干细胞向Ⅱ型肺泡细胞分化的实验研究

摘要

目的:建立一种简便高效的定向诱导小鼠胚胎干细胞向Ⅱ型肺泡细胞分化的方法.rn 方法:①通过细胞培养,获得充足小鼠胚胎干细胞,接种于小鼠胚胎成纤维细胞滋养层上,通过滋养层细胞以及白血病抑制因子来保持其多向分化能力.②STLV型生物反应器中培养的拟胚体在细胞大小、形态和数量方面均明显优于传统的悬浮培养法.③将STLV型生物反应器中制备并扩增得到的拟胚体,用ESC分化培养基连续贴壁诱导14d后,进行细胞染色,聚合酶链式反应检测.rn 结果:通过3个部分的实验,最终得到表达Ⅱ型肺泡细胞特异性标志物的细胞.前两部分中,得到了大量状态良好的未分化ESC,经扩增获得了高质量和大数量的EBS.在第三部分,免疫荧光及RT-PCR证明出现了Ⅱ型肺泡细胞特异性标志物-SPC的表达.rn 结论:通过以胚胎成纤维为种子细胞,利用组织工程的技术可形成Ⅱ型肺泡细胞.