膀胱癌移行细胞系双向电泳技术的建立

摘要

背景与目的:膀胱癌是泌尿系统中最常见的肿瘤,多数为移行上皮细胞癌,具有增长迅速、早期转移等特点.目前公开的数据库中尚未见到膀胱移行上皮癌双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱.rn 目的:是建立高分辨率的移行上皮癌细胞PUMC双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况.rn 方法:用固相PH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上皮癌细胞PUMC细胞总蛋白,凝胶考马斯亮蓝染色,然后利用GS-800 CalibratedDensitometer凝胶成像系统获取图像,用PDQuest 2D分析软件对图像进行背景消减、斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析.rn 结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶平均蛋白质点数为646±16,匹配点数为507±12,匹配率达76%,三块胶蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在IEF方向偏差是(0.96±0.27)mm,SDS-PAGE方向偏差是(1.21±0.24)mm.rn 结论:建立了膀胱癌移行上皮癌细胞PUMC的双向电泳检测方法,为进一步构建其蛋白质表达数据库以及研究膀胱移行上皮癌的蛋白表达图谱,并在此基础上进行与正常组织的差异蛋白显示比较,为肿瘤标志蛋白的筛选打下方法学基础.