基于铜绿假单胞菌群体感应苯磺酸氨氯地平增加抗菌效应的机制研究

摘要

目的：群体感应系统(QSS)为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)毒力因子表达的重要调控系统.PA群体感应(QS)的引发与胞质内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的升高有关.钙拮抗剂苯磺酸氨氯地平(AML)可拮抗胞外的Ca2+内流,调控PA的[Ca2+]i,从而抑制PA的QS.本研究探讨AML的QS抑制活性及其可能机制.rn 方法：微量肉汤稀释法测定药物对PA的最低抑菌浓度(MIC);光电比浊法测定AML对PA生长的影响;蛋白水解酶试验测定PA蛋白水解酶的表达;弹性蛋白酶试验测定PA弹性蛋白酶的表达;绿脓毒素试验测定PA绿脓毒素的表达;以Fura-2/AM为Ca2+荧光探针,并用双波长荧光分光光度法测定PA的[Ca2+]i结果：AML对PA的MIC为512μg·mL-1;AML(256、128μg·mL-1)可抑制PA的生长(P＜0.05);AML(64、32、16μg·mL-1)对PA的生长无影响;AML(64、32、16μg·mL-1)可明显抑制PA绿脓毒素的表达(P＜0.01);可抑制蛋白水解酶和弹性蛋白酶的表达(P＜0.05);AML(64、32、16μg·mL-1)可降低PA[Ca2+]i(P＜0.05).rn 结论：AML可抑制PA毒力因子的表达,其降低细菌毒力表达的作用可能与干扰PA的钙信号转导系统调控PA的QS系统有关.