三种禽流感诊断方法的比较研究

摘要

本研究分别应用病毒分离鉴定、反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光(IFA)三种方法对临床上疑似禽流感(AI)的病鸡进行诊断和比较.结果经鸡胚尿囊腔接种分离到一株病毒,经禽流感病毒(AIV)H5、H9亚型单克隆抗体鉴定为AIVH5亚型毒株;应用RT-PCR技术直接对病料组织抽提的RNA样品进行检测,结果从该病料组织能够扩增出大小为229bp的AIV通用目的片段和大小为380bp的H5亚型特异性片段;取病料组织的过滤液接种狗肾上皮细胞(MDCK)单层,24h后用H5单克隆抗体进行间接免疫荧光试验,结果在细胞核、细胞质内可见黄绿色的特异性荧光.研究的结果表明,三种诊断技术都可对临床上疑似AI的病鸡进行确诊,而RT-PCR和IFA两种方法还可直接对病料样品中的病毒进行亚型的鉴定.相对而言,后两者具有更快速、更敏感、操作更简便的特点.