超声联合携抗ICAM-1阳离子微泡增强基因转染受损内皮细胞

摘要

目的:探讨超声联合携抗ICAM-1阳离子微泡介导SDF-1α基因转染受损内细胞的效果.rn 方法:构建携SDF-1α基因-ICAM-1抗体-阳离子微泡的靶向微泡基因载体,实验分组:A组,靶向微泡基因载体组;B组:单纯阳离子微泡基因组;C组:单纯SDF-1α基因组;D组为空白对照.体外实验:人白细胞介素-1β刺激制备大量表达ICAM-1的血管内皮细胞模型,各组联合超声辐照介导基因转染后流式细胞仪测定基因转染率,PCR检测基因表达和Western Blot检测SDF-1α蛋白表达情况.体内实验:结扎冠状动脉前降支制备兔心肌梗死模型,超声辐照介导基因转染后取心肌组织石蜡切片,免疫组化染色,观察心肌组织SDF-1α的表达情况,Western Blot检测各组心肌SDF-1α蛋白表达,RT-PCR检测各组SDF-1αmRNA的表达.rn 结果:体外实验中流式细胞仪测得携SDF-1α基因-ICAM-1抗体-阳离子微泡的A组基因转染率26％,明显高于其他各组.在体内外实验中,A组:携SDF-1α基因-ICAM-1抗体-阳离子微泡组超声辐照介导基因转染后的hSDF-1α基因mRNA表达和hSDF-1α蛋白表达情况均高于其他各组,差异有统计学意义.rn 结论:当心肌梗死时,受损的微血管内皮细胞大量表达ICAM-1,而正常组织几乎不表达ICAM-1,所以用携抗ICAM-1的靶向微泡可特异识别且大量聚集黏附于受损内皮细胞上.联合超声的辐照使载基因微泡因"空化效应"而发生破裂,通过"声致孔隙"作用增加细胞膜通透性,加速细胞的内吞作用,将目的基因释放到被超声照射的靶组织中,促进基因转染.因此超声联合携抗ICAM-1阳离子微泡能增强SDF-1α基因转染受损内皮细胞.